Práctica 1: Epidermis de cebolla
1. ¿A qué se debe la gran extensión de la coloración de la célula tras la tinción con rojo neutro?
El colorante rojo neutro es un colorante vital (se tiñe sin alterar la célula), muy permeable a la membrana. Por ello, atraviesa y se acumula dentro de la gran vacuola vegetal. Lo que se observa al mirar por el microscopio la preparación de epidermis de cebolla teñida es el interior de esta con su vacuola vegetal hinchada y teñida.
2. ¿Qué papel desempeñan las diferentes concentraciones de las disoluciones de tampón fosfato y de cloruro sódico sobre el jugo vacuolar?
La disolución de tampón fosfato actúa como medio hipotónico en comparación con el interior de la célula, que sería un medio hipertónico. En consecuencia, la disolución coloreada pasa al interior de la célula por ósmosis y esta produce la turgencia (se hincha) pero no revienta. En cambio, cuando ponemos cloruro sódico, el medio se vuelve hipertónico respecto de la célula. La consecuencia es que la célula pierde agua por ósmosis, observándose como la membrana celular se separa del aprd y se arruga, originándose plasmólisis.
3. ¿A qué se atribuyen los cambios que se observan en la vacuola en cada caso?
El fenómeno de turgencia se produce cuando entra la disolución del tampón fosfato, mientras que el fenómeno de plasmólisis se produce por la salida del agua de la vacuola cuando usamos cloruro sódico.
Práctica 2: Tinción de gránulos de almidón de la patata
1. ¿Forma de los gránulos de almidón?
Son redondeados u ovalados y aparecen teñidos de azul violeta porque contienen almidón que reacciona con el lugol (reactivo yodo yoduro potásico), dando esta coloración. No es una reacción química, sino la unión del yodo con las cadenas de amilosa del almidón. Esta unión es reversible y depende de la temperatura.
2. ¿Relación del tamaño de los gránulos y el número de capas?
En el interior del amiloplasto, el almidón se va disponiendo en capas concéntricas. Cuantas más capas contenga, más grande será el amiloplasto.
3. ¿Yodo yoduro potásico para detectar almidón?
Podemos usar el lugol para comprobar si un alimento que no debe llevar almidón lo lleva. Es el caso de algunos fiambres (jamón cocido) que pueden llevar en su composición almidón de patata. En este caso, debería ser indicado en la etiqueta. El yoduro en presencia de almidón da el color azul que se detecta (amilosa) y amilopectina (naranja).
4. ¿Reacción de color y cambio de temperatura?
Podemos hervir patatas y recoger su caldo. Si lo dejamos enfriar y le ponemos lugol, se pondrá violeta, pero si lo volvemos a calentar (sin que llegue a hervir), veremos que la coloración desaparece. Si lo volvemos a dejar enfriar, volverá a tomar la coloración violeta. Cuando se pone violeta es porque el yodo se une a las cadenas de amilosa. Cuando pierde la coloración es porque el yodo se escapa de estas cadenas, por lo tanto, la reacción es reversible.
Práctica 3: Poder reductor de azúcares
1. ¿A qué se deben las diferencias observadas entre los cuatro carbohidratos analizados?
La glucosa y la fructosa (monosacáridos) tienen libre el grupo hidroxilo (OH) del carbono anómerico. En cambio, la sacarosa y el almidón (disacárido y polisacárido respectivamente) no lo tienen libre, ya que lo han «empleado» en establecer el enlace O-glucosídico. Los dos primeros transforman el Cu2+ (color azul) del CuSO4 en Cu+ (color rojo ladrillo).
2. ¿Resultados tras la hidrólisis de la sacarosa?
Al hidrolizar la sacarosa, libera glucosa y es esta la que da la reacción positiva (rojo) de la prueba con los líquidos de Fehling.
Práctica 4: Extracción y aislamiento de ADN
1. ¿Utilidad del NaCl y el detergente?
El detergente y la sal (NaCl) se emplean para romper las paredes celulares, la membrana celular y la membrana nuclear con el objetivo de liberar el ADN que se encuentra en el interior del núcleo celular.
2. ¿Componente que aporta y utilidad del zumo de piña o papaya?
El zumo de piña o papaya contiene una enzima llamada papaína que destruye las proteínas para que no interfieran en la prueba.
3. ¿Por qué incorporamos etanol frío al medio?
El ADN es soluble en el agua pero no en el alcohol. Se pone alcohol para que el ADN precipite en medio de los dos líquidos y podamos verlo concentrado.
Práctica 5: Cultivo de levaduras
1. ¿Qué ocurre en cada tubo?
Tubo 1: Nada, control negativo. Tubo 2: Respiran libremente. Tubo 3, 4 y 5: Cuanto más inhibidor presente, menos respiran.
2. ¿Función del tubo 1?
Se utiliza como control, al no llevar azúcar las levaduras no respiran, no se reproducen y no varía el volumen de aire.
3. ¿Por qué se añade glucosa en los tubos 3, 4 y 5?
Se añade glucosa para que las levaduras respiren usando el azúcar como fuente de energía y desprendan CO2.
4. ¿Diferencias entre los tubos 3, 4 y 5?
El volumen de aire en cada tubo habrá variado. El tubo 3 tendrá más volumen de aire porque la concentración de inhibidor (NaF) es baja (0,01M), luego vendrá el tubo 4 (0,05M) y por último será el tubo 5, que lleva más concentración de inhibidor (0,1M).