Clasificación de Preparaciones Microscópicas

Microscopía de Microorganismos Vivos

Sin colorear: Examen en fresco (gota pendiente)

Coloreadas: Tinción vital

Microscopía de Microorganismos Muertos

Con fijación:

• Tinción simple
• Tinciones diferenciales (Gram, Ziehl-Neelsen)
• Tinciones estructurales (flagelos, cápsulas, esporas, corpúsculos metacromáticos)

Clasificación por Método de Preparación

Preparaciones para Examen en Fresco sin Modificar

Examen en fresco, gota pendiente

Preparaciones para Examen en Fresco Ligeramente Modificadas

Tinción vital, positiva, negativa, preparación con KOH al 10%

Preparaciones Fijadas y Teñidas

Tinción simple, tinciones diferenciales (Gram, Ziehl-Neelsen), tinción estructural (flagelos, cápsulas, esporas, corpúsculos metacromáticos)

Observación in vivo

Se utiliza para el estudio morfológico y de la motilidad bacteriana. No puede ser reutilizada ni almacenada debido a la desecación y muerte de los microorganismos.

Técnicas de Tinción

Según el Procedimiento de Coloración

Inmersión: Permite teñir varias preparaciones a la vez, sumergiéndolas en el colorante.

Vertido: Se realiza por decantación del colorante sobre la preparación. Puede ser en condiciones normales o drásticas.

Según su Aplicación

Simple: Utiliza un solo colorante para observar la morfología y agrupación de los microorganismos.

Diferencial: Utiliza más de un colorante para resaltar características específicas de los microorganismos.

Estructural: Utiliza más de un colorante para visualizar estructuras bacterianas específicas.

Especiales: Emplean colorantes especiales para fines específicos.

Tinción sin Fijación

a) Positiva: El microorganismo vivo toma el colorante y se observa muerto. Se realiza de forma similar a la tinción vital.

b) Negativa: Se colorea el fondo para observar la morfología de bacterias y levaduras. Se utilizan colorantes como la tinta china.

Tinción con Fijación

Consiste en la muerte rápida de los microorganismos por coagulación de sus proteínas. La fijación se realiza comúnmente por calor.

a) Simple: Se utiliza un único colorante para observar la morfología.

b) Diferenciales: Permite diferenciar microorganismos según su afinidad por ciertos colorantes.

c) Estructurales: Permite visualizar estructuras bacterianas como cápsulas, esporas y flagelos.

Tinción de Gram

Clasifica los microorganismos en Gram positivos y Gram negativos según su capacidad para retener el colorante cristal violeta. Los Gram positivos retienen el colorante, mientras que los Gram negativos lo pierden al ser decolorados con alcohol.

Tinción Ziehl-Neelsen

Demuestra la resistencia de algunas bacterias a la decoloración por ácidos y alcoholes debido a su alto contenido en lípidos en la pared celular. Es una tinción en condiciones drásticas con emisión de vapores.

Tinción de Esporas

Permite visualizar las endosporas, formas de resistencia producidas por algunos géneros como Bacillus en condiciones desfavorables.

Tinción de Cápsulas

Las cápsulas, presentes en bacterias patógenas, se observan como un halo transparente alrededor de la célula mediante tinción negativa.

Tinción de Flagelos

Los flagelos, estructuras de movilidad bacteriana, son difíciles de observar y requieren técnicas especiales de tinción.

Tinción de Corpúsculos Metacromáticos

Son gránulos de reserva de fosfato que se tiñen de un color complementario al colorante utilizado. Se forman por carencia de nutrientes como el sulfato.

Tinciones Especiales

Tinción Fluorescente

Utiliza colorantes que emiten luz visible al ser excitados con luz ultravioleta.