Bioquímica Clínica: Técnicas y Métodos Analíticos

Bioquímica clínica

Ciencia que estudia los procesos metabólicos y moleculares que tienen lugar en nuestro organismo.

Magnitud bioquímica

Signos clínicos, valores cuantitativos de la química de los procesos metabólicos que se utilizan para conocer el estado clínico de un paciente.

Técnica espectrometría

Técnicas que se basan en la medición de las radiaciones electromagnéticas por sus propiedades de interacción con la muestra.

Espectroscopia

Estudia cómo interaccionan los átomos y moléculas con las radiaciones electromagnéticas.

Espectrometría

Disciplina que mide la energía absorbida o emitida por átomos o moléculas.

Monocromador

Dispositivo óptico que permite seleccionar y transmitir una radiación monocromática a partir de la luz generada por la fuente emisora.

Colimador

Lente de luz de radiación que incide hacia el prisma.

Absorbancia

Cantidad de luz que es absorbida por la disolución.

Transmitancia

Es el % que hay entre la luz transmitida y la incidente, es decir, es la cantidad de luz que atraviesa la muestra sin ser absorbida ni dispersada.

Blanco de reactivos

Es la cantidad igual de los mismos reactivos, tratados de la misma manera que la muestra, pero no contiene muestra.

Suero control

Es un blanco al cual se le ha agregado la cantidad límite de la sustancia a ensayar o determinar si es una solución de comparación que está preparada y que contiene analitos presentes valorados y certificados según se indica en los ensayos específicos.

Solución patrón

Sustancias acuosas que contiene una concentración conocida y exacta del analito que se investiga en la muestra.

Actividad enzimática:

Es la cantidad de enzima que cataliza la transformación de micromol de sustrato por minuto.

Refractometría

Técnica de análisis basado en el fenómeno de refracción de la luz, que mediante medidas de índice de refracción, posibilita realizar análisis cualitativos y cuantitativos. Ej: Se empieza en el estudio de solutos.

Fase móvil

Gas o líquido que ejercerá el efecto del desplazamiento de los componentes de la muestra.

Fase estacionaria

Está incluida en un soporte que puede ser una columna o superficie sólida y retendrá los componentes.

Osometría

Medida del efecto osmótico de una solución (número de partículas de soluto disuelto en una muestra), y es independiente del tamaño o la carga de los iones o moléculas presentes.

Colorímetro-Espectrofotómetro

Colorímetro: Trabaja únicamente en el espectro de la luz visible mientras que el espectrofotómetro es capaz de trabajar con la VIS, UV, IR. Espectrofotómetro: Utilizan prismas y redes de difracción mientras que el colorímetro filtros de absorción y de interferencia.

Espectroscópicos

Existe intercambio de E, Transiciones entre distintos niveles energéticos, Miden la intensidad de la E y la longitud de onda de la E radiante.

No espectroscópicos

No existe intercambio de E, No hay transiciones entre distintos niveles energéticos, No miden la intensidad de la E y la longitud de onda de la E radiante.

Turbidimetría-Nefelometría

La turbidimetría mide la turbidez de la muestra por lo cual se mide la I de luz transmitida que atraviesa la cubeta y la nefelometría es una técnica cuantitativa de suspensión que consiste en medir la I de luz dispersada en un ángulo de 90º.

Fluorescencia-Fosforescencia: FL

El analito es excitado a un estado de gran E a través de una fluorescencia, se utiliza un fluorímetro que mide el espectro de emisión ángulo 90º, Mide la luz fluorescente emitida por moléculas que poseen anillos aromáticos o dobles enlaces conjugados, Muy útil en inmunoanálisis para concentraciones pequeñas. FOS: Las moléculas son capaces de almacenar la E absorbida de la REM y pasar a un estado excitado y emitir lentamente fotones de baja energía.

Cromatografía de absorción

FM L/G FE S La separación depende de la polaridad de las moléculas de la muestra y hacen columna.

Cromatografía de intercambio iónico

FM L FE S Se basan en la interacción iónica del soluto con la FE que tiene grupos funcionales cargados.

Cromatografía de afinidad

FM L FE S Separan sustancias que pueden establecer uniones ligando-receptor, enzima-sustrato o Ag-Ac.

Cromatografía de exclusión

FM L FE S Las sustancias se separan en función de su tamaño y forma, aumenta su tamaño no caben en los poros de las esferas.

Cromatografía de reparto

FM L FE L Separa las sustancias según su distribución en 2 fases líquidos inmiscibles.

¿Qué pasa cuando un átomo o molécula absorbe una radiación electromagnética?

Provoca transiciones de e- entre distintos orbitales que representan estados energéticos superiores. 2 formas: Disipando la E en forma de calor y Disipando la E en forma de calor y otra parte emitiendo en forma de radiaciones electromagnéticas para fines analíticos.

Desviaciones en lambert beer

DESVIACIONES INSTRUMENTALES 1. Alteraciones en la luz incidente: La radiación incidente no es monocromática ya que las moléculas tienen diferentes coeficientes de absorción en función de la longitud de onda. S: Poner un monocromador. 2. Errores en la rendija de salida: Se produce cuando la anchura y la posición de la rendija de salida de la luz cambian la longitud de onda. S: Poner la rendija bien. 3. La cubeta: El material de fabricación y su grosor, estado de mantenimiento pueden producir errores. S: Limpieza. 4. El detector: Luz procedente de otros lugares distintos a la fuente de luz. 5. Radiación de longitud de onda no óptima o no selectiva. DESVIACIONES QUÍMICAS 1. Si la A del solvente es significativa comparada con la del soluto. 2. Si hay interferentes, en la solución hay otros componentes que absorben a la longitud de onda que se aplica. 3. Si existe fenómeno de fluorescencia. 4. Si se pueden producir reacciones químicas entre compuestos que den lugar a otro cromógenos.

Tenemos un aumento de concentración del analito:

Proporciona concentraciones falsas y la lectura de absorbancia está fuera de los límites de la linealidad. S: Diluir la muestra para que su concentración quede dentro.

Deja una respuesta

Tu dirección de correo electrónico no será publicada. Los campos obligatorios están marcados con *