¿Qué es la Histología?
La histología (del griego ἱστός histós «tejido» y -λογία -logía, tratado, estudio, ciencia) es la ciencia que estudia todo lo referente a los tejidos orgánicos: su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones.
Ramas de la Histología
- Anatomía microscópica (Forma): Marcelo Malpighi es considerado el padre de la anatomía microscópica.
- Citología (Función): Estudia el interior de la célula y otros corpúsculos.
- Relación con otras ciencias: Se relaciona estrechamente con la bioquímica y la citología.
Tipos de Epitelio
Epitelio de Revestimiento
- Epitelio Simple Plano: Presente en alvéolos pulmonares y capilares sanguíneos. Secreta fluido seroso y permite el intercambio gaseoso.
- Epitelio Simple Cúbico: Se encuentra en los túbulos renales y glándulas, donde secreta y absorbe sustancias.
- Epitelio Simple Cilíndrico: Presente en el intestino, secreta enzimas y mucosidad para la digestión.
Epitelio Glandular
- Glándulas Exocrinas: Secretan sus productos a través de conductos hacia el exterior del cuerpo o a cavidades internas. Ejemplos: glándulas salivales (saliva) y glándulas sebáceas (sebo).
- Glándulas Endocrinas: Secretan hormonas directamente al torrente sanguíneo. Ejemplos: glándula tiroides y glándula adrenal.
Epitelio de Transición
- Presente en las vías urinarias, este tipo de epitelio tiene la capacidad de estirarse y contraerse, permitiendo la distensión de la vejiga y los uréteres.
Epitelio Ciliado
- Presente en las vías respiratorias, como la tráquea y los bronquios, secreta mucosidad y transporta partículas atrapadas por los cilios hacia el exterior.
Epitelio Estratificado Plano
- En la piel, este epitelio actúa como una barrera protectora y secreta sustancias como el sebo a través de las glándulas sebáceas.
Componentes del Tejido
Estroma
El estroma (del griego stroma, capa subyacente) proporciona soporte y nutrición al tejido conectivo. Es el armazón o entramado de tejido conjuntivo laxo con nervios y vasos sanguíneos.
Parénquima
El parénquima (del griego parenchyma, «al lado») está constituido por las células funcionales del tejido. Por ejemplo, el tejido epitelial de un adenómero o las células parietales.
Matriz Extracelular
La matriz extracelular es fundamental para mantener la forma y la consistencia del organismo.
Membrana Basal
La membrana basal es una estructura laminar extracelular que limita y relaciona el tejido epitelial con el tejido conjuntivo.
Lámina Basal
Funciona como filtro molecular debido a la presencia de una malla de colágeno tipo IV con carga negativa.
Lámina Reticular
Formada por colágeno tipo III.
Colorantes en Histología
Hematoxilina
Es un colorante iónico básico (con carga positiva) que tiñe estructuras con cargas negativas. Los núcleos se tiñen de color azul (basófilos).
Eosina
Es un colorante iónico ácido (con carga negativa) que tiñe estructuras con cargas positivas. El citoplasma se tiñe de color rosado (eosinófilos o acidófilos).
Componentes de los Colorantes
- Cromóforo: Proporciona el color.
- Auxócromo: Permite la unión del colorante con los tejidos.
Técnicas Histológicas: Preparación de Muestras
- Obtención de la muestra: Extirpación de pequeños fragmentos de tejido (humano o animal).
- Fijación: Mantiene la morfología del tejido lo más parecido posible a su estado original. Se utiliza comúnmente formaldehído al 37%.
- Deshidratación: Eliminación completa del agua de la muestra mediante alcohol etílico en concentraciones crecientes.
- Aclaramiento: Sustitución del agente deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión (ej. Xilol).
- Infiltración (Impregnación): Relleno de la muestra histológica con el medio de inclusión (baños sucesivos de parafina fundida).
- Encastramiento del tejido y confección de los bloques: Obtención de un bloque sólido de tejido más medio de inclusión (TACO) mediante enfriamiento lento a 10-15°C.
- Orientación de la pieza y corte: Montaje del taco en el micrótomo y obtención de cortes delgados (5-10 micrómetros para microscopía óptica). (1 milímetro = 1000 micrómetros).
- Montaje: Colocación de los cortes sobre láminas portaobjetos cubiertos con albúmina o gelatina.
- Aclaramiento (segunda fase): Extracción de la parafina con xilol.
- Rehidratación: Desplazamiento del xilol por agua, utilizando alcohol con agua en concentraciones decrecientes.
- Tinción o Coloración: Uso de colorantes histológicos, generalmente en solución acuosa.
Procedimiento de Tinción con Hematoxilina y Eosina (H&E)
- Sumergir la canastilla con las preparaciones en hematoxilina durante 5 minutos.
- Enjuagar en agua corriente hasta que el agua salga clara.
- Quitar el exceso de hematoxilina con una solución de alcohol ácido durante 1-2 segundos.
- Enjuagar en agua corriente inmediatamente.
- Restaurar el pH de los tejidos con agua amoniacal durante 1-2 segundos.
- Enjuagar en agua corriente durante 5 minutos.
- Sumergir 10-15 veces en alcohol al 50%.
- Sumergir en eosina durante 3-5 segundos.
- Enjuagar y comenzar a deshidratar en alcohol de 96°, sumergiendo 10-15 veces.
- Pasar las preparaciones por dos cambios de alcohol etílico absoluto, sumergiendo 10-15 veces.
- Pasar por dos cambios de xilol, sumergiendo 10-15 veces.
- Sacar las preparaciones del transportador y colocar una gota de resina sobre el tejido.
- Colocar un cubreobjetos sobre la resina, evitando burbujas de aire.
- Dejar secar y guardar las preparaciones.