Historia y fundamentos de la microscopía

Historia de la Microscopía Óptica

1611: Johannes Kepler sugiere cómo construir un microscopio compuesto.

1655: Robert Hooke publica Micrographia. Nace el concepto de célula. Paralelamente, Antonie van Leeuwenhoek construye más de 200 microscopios (lupas).

Principios del siglo XIX: G. Battista Amici corrige la aberración esférica y la aberración cromática. Posteriormente, Ernst Abbe construye el primer objetivo apocromático.

Finales del siglo XIX: Descripción de muchos tipos diferentes de tejidos, del núcleo celular, las mitocondrias de las células musculares y del comportamiento de los cromosomas durante la mitosis de las células animales. Se identifican las bacterias causantes de la tuberculosis y el cólera y se describe el aparato de Golgi.

1835: Schleiden y Schwann proponen la llamada teoría celular.

Los Primeros Microscopios Ópticos

En 1655: Robert Hooke observa, por el microscopio que él mismo construyó, el corte de un trozo de corcho. Usó la palabra célula para describir las partes pequeñas y cerradas que observaba.

Antonie van Leeuwenhoek: Construyó más de 200 microscopios (lupas de hasta 270 aumentos) que consistían en una placa de cobre en la que había una perla de vidrio a través de la cual se observaban los objetos, pegados con una aguja para que no se movieran.

A principios del siglo XIX: Giovanni Battista Amici y Ernst Abbe (objetivo apocromático) corrigieron la aberración esférica y la aberración cromática.

A finales del siglo XIX: Hubo muchos avances en las descripciones de diferentes elementos, por parte de numerosos científicos.

Preparación de las Muestras para el Microscopio Óptico

  1. Hay que teñir el material con colorantes específicos.
  2. A menudo, antes de teñir la muestra, hay que fijarla para impedir que se deteriore y facilitar la impregnación con el colorante.
  3. Para evitar distorsiones en las células y ahorrarnos la fijación y la inclusión, en algunos casos se puede congelar la muestra. Entonces necesitaremos un microtomo especial (criostato).
  4. El montaje es el último paso en la preparación de la muestra. Puede ser temporal o permanente, y, según el tipo de material que se quiere observar, el montaje se realiza en un medio hidrosoluble o no hidrosoluble.

Preparación de las Muestras para el Microscopio Electrónico

La preparación es más compleja y no podemos observar material vivo.

  1. Fijar la muestra con un agente estabilizador de las proteínas y los lípidos, para que no se alteren (glutaraldehído o tetraóxido de osmio).
  2. Hacer secciones de entre 50 y 100 nm de espesor (infiltrarse resina en la muestra para hacer cortes ultrafinos).
  3. Colocar los cortes seriados sobre un portaobjetos especial (rejilla de cobre).
  4. Cubrir el objeto con un metal pesado (plomo o uranio) para aumentar el contraste a los electrones.
  5. Hacer la visualización (no se hace directamente, sino por medio de una pantalla fluorescente o bien con fotografías).

Tipos de Microscopios

Microscopios con Luz Visible

  • Microscopio óptico tradicional
  • Microscopio de polarización
  • Microscopio de contraste de fases
  • Microscopio de contraste interferencial
  • Microscopio de fluorescencia
  • Microscopio confocal

Microscopios Electrónicos

  • Microscopio electrónico de transmisión
  • Microscopio electrónico de rastreo

Microscopios con Otros Tipos de Ondas

  • Microscopio de radiación infrarroja
  • Microscopios de radiación ultravioleta
  • Microscopios de rayos X o Röntgen
  • Microscopio de efecto túnel
  • Microscopio de fuerza atómica

Teoría Celular

La teoría actual sostiene que la célula es la unidad estructural, funcional y genética de todo ser vivo.

  • Unidad estructural: Es la parte más pequeña de todo ser vivo.
  • Unidad funcional: Es capaz de nutrirse, reproducirse y relacionarse.
  • Unidad genética: Desde el punto de vista evolutivo, proviene de las primeras células que aparecieron en la Tierra, hace 3.500 millones de años.

Tipos de Células

Procariota

  • Las moléculas de ADN están repartidas por todo el citoplasma y no están rodeadas por una membrana nuclear ni constituyen cromosomas típicos.
  • Tienen el citoplasma sin compartimentar, sin espacios fijos separados por membranas (cada espacio tiene una función).
  • Todos los seres del reino de las moneras presentan este tipo de célula.

Eucariota

  • Tiene un envoltorio membranoso que separa el material genético del resto del citoplasma (núcleo celular).
  • Tiene el citoplasma compartimentado en espacios separados por membranas (orgánulos celulares con función específica).
  • Protistas, hongos, animales y plantas están constituidos por este tipo de células, pero tienen sus características propias.

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