Mediadores Químicos de la Inflamación y Metabolismo en Diabetes: Un Análisis de Conceptos Clave

MEDIADORES QUÍMICOS DE LA INFLAMACIÓN
• Sustancias de naturaleza química y origen muy diversos.
• Su activación y liberación está muy regulada. Una vez activados o liberados tienen una vida media muy corta.
• La mayoría se unen a receptores celulares específicos, pero otros tienen actividad enzimática o tóxica directa.
• Producen efectos múltiples y actúan sobre diferentes tipos celulares y su efecto puede variar en función de la célula.
• Se diferencian dos tipos:
Plasmáticos: generados por sistemas enzimáticos presentes en plasma.
Tisulares: liberados por las células.

MEDIADORES PLASMÁTICOS
• Sistemas enzimáticos interrelacionados entre sí que se activan a través de cascadas proteolíticas (amplificación):
– Sistema de la coagulación
– Sistema fibrinolítico
– Sistema del complemento
– Sistema de las cininas
• Activación del Factor XII de la coagulación

PERFIL METABÓLICO EN LA DIABETES

Diabetes mellitus tipo I

• Nivel de insulina bajo  deficiente entrada de glucosa en las células (hiperglucemia)
• En hígado: ↑ gluconeogénesis, ↓ glicolisis, ↑ degradación de glucógeno
Liberación de glucosa a sangre y aumento de su excreción en orina (glucosuria, poliuria, polidipsia)
• Activación de lipolisis y proteolisis.
• Metabolismo hepático de ác. grasos: cetogénesis (cetoacidosis) y liberación VLDL (hipertrigliceridemia)
Los tejidos actúan como en el ayuno → acúmulo de combustibles en sangre

Diabetes mellitus tipo II

Producción limitada de insulina y/o resistencia a la acción de la insulina.

CICLO AYUNO-ALIMENTACIÓN

Estado post-absortivo o de buena alimentación

• La secreción de insulina estimula el almacenamiento de combustibles y la síntesis de proteínas.
• Rutas más activas:
– Síntesis de glucógeno
– Lipogénesis hepática
En el hígado se frena la gluconeogénesis y se activa la glicolisis (favorece la formación de grasas)

Ayuno de corta duración

• Secreción de glucagón: movilización de glucógeno y reducción de síntesis de ác. grasos.
• El hígado aporta glucosa al resto de tejidos.
• Rutas más activas:
– Degradación de glucógeno
– Gluconeogénesis

Estado de ayuno

• Se agota el glucógeno hepático.
• El hígado exporta cuerpos cetónicos.
• Se requiere síntesis neta de glucosa (indispensable para el cerebro) a partir de proteína (principalmente del músculo).
• Rutas más activas:
– Gluconeogénesis (lactato, glicerol y aminoácidos)
– Proteolisis
– Lipolisis
– Cetogénesis

  • ¿Cómo se prepararían 10 mL de glucosa 20 mM a partir de una disolución concentrada de glucosa 1 M? Con 20 µL de disolución concentrada y 9,8 mL de agua.
  • ¿Cuántos gramos de NaOH (PM= 40 g/mol) harían falta para preparar un litro de una disolución de 10 mM? 0,04 g.
  • ¿Qué es un tubo Eppendorf? Un pequeño vial cónico provisto de tapa usado normalmente para centrifugar o almacenar pequeños volúmenes de disoluciones.
  • En el proceso de aislamiento de DNA utilizando en prácticas se añadió el detergente iónico SDS al homogenizado de tejido, ¿cuál es el papel de este detergente? Desorganizar las membranas celulares para liberar los ácidos nucleicos.
  • En una de las etapas del protocolo de extracción y purificación de DNA genómico se añade 2 volúmenes de etanol frío al 100%, ¿cuál es la finalidad de este paso? Desnaturalizar los ácidos nucleicos.
  • Tras purificar el DNA, su concentración se determina mediante espectrofotometría a partir de… Del coeficiente de absorbancia a 260 nm y 280 nm.
  • ¿Cómo se define el coeficiente de extinción? Es la constante de proporcionalidad entre la absorbancia de un cromóforo a una determinada longitud de onda y su concentración.
  • El cromóforo característico de los ácidos nucleicos corresponde a… Las bases nitrogenadas.
  • La ley de Lambert-Beer… Nos indica que la concentración de una molécula es inversamente proporcional a su absorbancia.
  • Suponiendo que una muestra determinada contiene un tipo de proteína cuyo espectro de absorción UV-Vis se desconoce, ¿es posible determinar su concentración aplicando directamente la ley de Lambert-Beer? Sí, si registramos el espectro en condiciones estándar.
  • En las determinaciones espectrofotométricas, las curvas patrón…
  • Del siguiente material de laboratorio, ¿qué sería necesario utilizar para la técnica de Lowry? Una cubeta de espectrofotómetro.
  • En una electroforesis… Las cargas negativas se dirigen hacia el ánodo.
  • En una electroforesis sobre un soporte no restrictivo… El tamaño de poro del soporte es similar al de las moléculas de la muestra.
  • ¿De qué depende en general la movilidad electroforética? De la relación carga/masa de las moléculas.
  • ¿Por qué es importante el pH en una separación electroforética de proteínas? Porque el pH nos permite observar las bandas de proteínas una vez separadas.
  • Los puntos isoeléctricos de 3 proteínas A, B y C son, respectivamente, 4, 5, y 6. Si llevamos a cabo una electroforesis en acetato de celulosa de una mezcla de esas 3 proteínas utilizando un tampón a pH 4, ¿qué ocurrirá? Las 3 proteínas se mueven hacia el cátodo.
  • Una de las siguientes afirmaciones NO es cierta en relación a la determinación realizada en el laboratorio de la actividad enzimática de la sacarosa (invertasa) con el reactivo 3,5-DNS. El 3,5-DNS se añadió, como una solución fuertemente alcalina, antes que la enzima.
  • Cuando se valoró la actividad de la invertasa a distintos pHs (3,5, 5,0, 6,5 y 8,5) se observó que dicha actividad… Presentaba un máximo a un pH determinado.
  • Cuando se valoró la actividad de la invertasa se determinó la absorbancia de los productos elaborados a 530 nm y el valor obtenido se interpoló en una curva patrón (Y= absorbancia, X= µmoles de producto).

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